小鼠ELISA試劑盒是通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附反應進(jìn)行實(shí)驗來(lái)檢測特定物質(zhì)的試劑盒,試劑盒中會(huì )有不同濃度的標準樣品,在酶標條中通過(guò)固相的抗原或抗體,酶標記的抗原或抗體,酶作用的底物反應可形成標準曲線(xiàn),從而進(jìn)行試驗樣品的測定。
小鼠ELISA試劑盒可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物等均可作標本,以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時(shí)會(huì )釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會(huì )增加非特異性顯色。
小鼠ELISA試劑盒辨別優(yōu)劣的方法:
1. 選定一個(gè)檢測范圍內的濃度做多孔重復,可看出平行性好不好。即板內CV值的大小,此操作時(shí)需要小心加樣的準確性。對一些制作較粗糙的試劑盒來(lái)說(shuō),板間CV值是較大的。
2. 可采用已知濃度的重組細胞因子,稀釋到檢測范圍內作為樣本加入,看檢測的準確性。
3. 對用待測指標的重組細胞因子做試劑盒說(shuō)明書(shū)上標定的zui小濃度稀釋?zhuān)蓽y出靈敏度,建議5個(gè)復孔以上才有意義。一般廠(chǎng)家以20個(gè)復孔做出的結果作為檢測限。用此實(shí)驗可驗證出所購試劑盒的靈敏度是否如說(shuō)明書(shū)所述,也可判斷出所購試劑盒是否有夸大之說(shuō)。
4. 如果有相同指標的小鼠ELISA試劑盒,可用對方的標準品作為樣本,分別加入各自的試劑盒做檢測,以檢測試劑盒的真實(shí)性,準確性。如其中一種是的,比較可靠的話(huà),可作為標準來(lái)驗證另一試劑盒的準確程度。