elisa試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實(shí)驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結果判斷較客觀(guān)等因素,已廣泛應用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
elisa試劑盒規范使用,效果會(huì )更好
1、樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的成長(cháng),其所排泄的一些酶或許會(huì )對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會(huì )對用相應酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。
2、血清標本如是以無(wú)菌操作分離,則能夠在2~8℃下保存一周,豬elisa試劑盒如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長(cháng)期保存,應在-70℃以下。
3、要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過(guò)氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的豬elisa試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡(jiǎn)單在溫育進(jìn)程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
4、標本在保存中如呈現細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時(shí),應離心沉積后取上清檢測。Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的試驗確診辦法。因為其試劑安穩、易保存,操作簡(jiǎn)便,成果判斷較客觀(guān)等要素,已廣泛應用在免疫學(xué)查驗的各領(lǐng)域中。
5、冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等形成的重復凍融。豬elisa試劑盒標本的重復凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)生損壞作用,然后引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻亦應留意,不要進(jìn)行劇烈振動(dòng),重復倒置混勻即可。
在進(jìn)行elisa試劑盒實(shí)驗時(shí),各項條件的選擇也是非常重要的:
1、固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚苯乙烯、纖維素等。其形式可以是凹孔平板、珠粒等。目前常用的是四十孔的聚苯乙烯凹孔板。不論使用哪一種載體,在使用前進(jìn)行篩選:在同一實(shí)驗條件下進(jìn)行反應,觀(guān)察其顯色反應的均一性如何,以此來(lái)判斷其吸附性能是否良好。
2、包被抗體的選擇:將抗體吸附在固相載體表面的時(shí)候,一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度,進(jìn)行包被后,當其它試驗條件大致一樣的情況下,觀(guān)察陽(yáng)性標本的OD值。選擇蛋白量少,OD值大的濃度。