布魯氏菌檢測試劑盒利用實(shí)時(shí)熒光PCR原理，主要用于布魯氏菌的定性篩查檢測。針對布魯氏菌基因設計特異性引物和分子信標探針，在待檢樣本中含有布魯氏菌DNA的情況下，PCR反應得以進(jìn)行并釋放熒光信號。利用儀器對PCR過(guò)程中相應熒光信號進(jìn)行實(shí)時(shí)監測和輸出，實(shí)現檢測結果的定性分析。
布魯氏菌檢測試劑盒檢驗方法：
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條，設空白對照1孔、陰性/陽(yáng)性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽(yáng)性對照孔分別加入陰、陽(yáng)性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻，置37℃反應30分鐘。
5.扣去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。
6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘。
7.洗滌，扣去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調零，于450nm測定各孔吸光值。
布魯氏菌檢測試劑盒正確使用注意：
1.準備過(guò)程，試劑操作準備的不當很可能影響酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA結果。
2.當混合蛋白溶液時(shí)應盡量輕緩，避免起泡。
3.洗滌過(guò)程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。
4.一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
5.請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn)，做復孔。
6.如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高，請先稀釋后再測定。
