牛ELISA試劑盒使用步驟是怎樣的: 1.即將進(jìn)行試驗的版孔進(jìn)行設定好,規范品5個(gè)點(diǎn),每個(gè)點(diǎn)設定平行,需求用到10個(gè)孔,空白只需1個(gè)孔。剩下孔能夠做為樣本孔
2.稀釋規范,準備好5個(gè)EP管,然后在每個(gè)EP管中參加150微升規范稀釋液,編上編碼,分別為1,2,3,4,5,在1號管中參加150規范品,用槍頭重復吹打10次左右(留意操控起伏不要過(guò)大簡(jiǎn)單發(fā)生氣泡)如果有渦旋儀能夠在渦旋儀上渦旋5秒左右,然后換槍頭,在1號管中取150微升參加到2號管,后面進(jìn)程一次類(lèi)推。終稀釋完,前面4個(gè)管中每管液體在150微升,5號管為300微升。濃度是從大到小。
3.規范、樣本、空白加樣:規范是每個(gè)濃度點(diǎn)2個(gè)孔(做平行),每孔參加50微升,加樣進(jìn)程中留意換槍頭,樣本孔中每孔參加50微升,加樣進(jìn)程中留意換槍頭,空白孔參加50微升蒸餾水。特別要闡明的是,規范加樣和樣本加樣盡量操控在15分鐘內加完,如果時(shí)刻拖的太長(cháng),會(huì )導致前面孔先反響后面孔才開(kāi)端反響,這樣數值誤差過(guò)大。加完樣后蓋上封板膜,至37攝氏度孵育30分鐘.
4.洗版,在孵育進(jìn)程中能夠將洗滌液配好,20ml30倍濃縮洗滌液用蒸餾水或許去離子水定容到600ml即可。每孔參加250-300微升的洗滌液(不要漫過(guò)版孔),(如果有震動(dòng)儀的話(huà),能夠講板子放入震動(dòng)儀上5秒左右,然后靜止三十秒,沒(méi)有請疏忽次進(jìn)程)將板子在桌子上晃動(dòng)5秒左右,然后靜置30秒,甩干,決定。闡明:甩干進(jìn)程盡量要快,1秒內就能夠完結,不要漸漸歪斜倒掉液體,直接翻板甩掉液體即可。決定進(jìn)程需求在桌子上墊一層吸水紙或許濾紙,版孔朝下拍幾下,拍干差異主要看吸水紙和濾紙上沒(méi)有顯著(zhù)的水漬為完結。
5.每孔參加50微升的酶標試劑,此處在空白孔中不需求加(空白孔為空),孵育30分鐘。
6.洗版進(jìn)程與4一樣。
7.顯色,先每孔中參加50微升的顯色A液,然后每孔中參加50微升顯色B液。避光37攝氏度顯色15分鐘
8.停止,每孔參加50微升的停止液,留意,加完停止液必須在15分鐘內讀數,超越時(shí)刻讀數無(wú)效。在規則時(shí)刻內讀數都是有用的。