在
ELISA試劑盒實(shí)驗中,用直接法測定抗體,不能直接用酶符號測定抗體,然后直接加入底物。而要加酶標抗抗體呢?
如果將酶符號應用于待測抗體,直接法比經(jīng)典法更復雜,在探索符號條件時(shí),不能保證抗體因誤操作而失活;酶標二抗目前已較為常見(jiàn),被規?;a(chǎn),購買(mǎi)后使用方便。如果你直接做好了,方法已經(jīng)優(yōu)化了,d一抗二抗顯色,總時(shí)間加起來(lái),結果不會(huì )超過(guò)2到3小時(shí)。
可以使用直接ELISA法,即抗體包板用來(lái)在抗原上標記酶,然后顯色,這與直接方法相比,減少了一步的時(shí)間,縮短了時(shí)間。然而,直接法和直接法各有優(yōu)缺點(diǎn),其要求取決于實(shí)驗的具體要求。
1、要檢測的抗體通常是免疫后產(chǎn)生的抗體。其中有免疫功能衰竭、抗體過(guò)少等因素存在。酶符號的使用存在許多不確定因素,如在使用酶符號之前無(wú)法測量效價(jià)的可能性,這會(huì )導致不必要的混淆。
2、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)中酶聯(lián)抗體與抗體結合后,ELISA試劑盒具有很強的信號放大作用,可使信號擴增一千倍以上,適用于低抗體含量的測定。
3、直接酶標記抗體在篩選出單克隆抗體后可以考慮,但測定系統的建立需要大量的工作。
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