ELISA試劑盒在實(shí)際應用的過(guò)程中，得通過(guò)不同的設計，不好走和方法都是有很多種類(lèi)的，像是接法、競爭法、雙位點(diǎn)一步法、捕獲法測IgM抗體、應用親和素和生物素的ELISA。今天小編就跟大家講講ELISA方法設計都有哪些原理嗯?
ELISA試劑盒以免疫學(xué)反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。
應用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入，再與HRP標記的抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。
ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值)，通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品的濃度。
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