ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標記在抗體/抗原分子上,形成酶標抗體/酶標抗原,稱(chēng)為酶結合物。該酶結合物的酶在免疫反應后,作用于底物使之呈色,根據顏色的有無(wú)和深淺,定位或定量抗原/抗體。
ELISA試劑盒是免疫酶技術(shù)的一種,其特點(diǎn)是利用聚苯乙烯微量反應板(或球)吸附抗原/抗體,使之固相化,免疫反應和酶促反應都在其中進(jìn)行。在每次反應后都要反復洗滌,這既保證了反應的定量關(guān)系,也避免了末反應的游離抗體/抗原的分離步驟。在ELISA法中。酶促反應只進(jìn)行一次,而抗原、抗體的免疫反應可進(jìn)行一次或數次,即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進(jìn)行免疫反應。
該試劑盒技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn),并能利用某些非免疫反應試劑(如SPA、凝集素等)的作用,發(fā)展成為許多新方法。此外,發(fā)展Elisa技術(shù)還可以從酶及其底物兩方面著(zhù)手。這是因為:用于Elisa技術(shù)的酶其種類(lèi)遠遠多于可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素。
生物界的酶多種多樣,有希望開(kāi)發(fā)很多類(lèi)型的酶用于Elisa試劑盒,并建立相應的Elisa方法。相反,自然界的化學(xué)元素是有限的,放射性同位素的種類(lèi)更加有限。第二,由于酶的多樣性,酶作用底物也有多種多樣,與此相對應的生色源或供氫體的種類(lèi)也有遠大的開(kāi)發(fā)和發(fā)展潛力。
試劑盒比色結果:比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著(zhù)的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗,需先將板置于標準96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。