人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒操作步驟以及注意事項
更新時(shí)間:2019-05-05 點(diǎn)擊量:1341
人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒操作步驟及注意事項
人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒操作步驟
- 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
- 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
- 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
- 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
- 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
- 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
- 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。
人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒注意事項
- 嚴格按照規定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
- 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
- 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
- 底物顯色液應呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
- 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
- 在儲存和溫育時(shí)避免強光直接照射。
- 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
- 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會(huì )破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
- 不能使用過(guò)期產(chǎn)品。
- 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。