描述:沙門氏菌SPP-sdfiPCR試劑盒是上海臻科生物科技有限公司的產(chǎn)品,靈敏度好,準(zhǔn)確性高,現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎廣大新老客戶前來選購。
【產(chǎn)品名稱】沙門氏菌SPP-sdfiPCR試劑盒
【包裝規(guī)格】 50T/盒實(shí)時(shí)熒光PCR法
適用于檢測,可用于臨床沙門氏菌SPP-sdfi感染的輔助診斷,但不作確診使用。
利用相應(yīng)儀器對 PCR 過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測,實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果的定性分析,用于臨床上對可疑感染者的病原 學(xué)診斷。
反應(yīng)液、酶液、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品。
-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個(gè)月。
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸, 嚴(yán)禁反復(fù)凍融。
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1.1樣本前處理 血液、體液和棉拭子樣本取 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。 核酸提取 推薦采用核酸提qu或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進(jìn)行核酸提qu, 請按照試劑說明書進(jìn)行操作。
試劑RP
將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,21μL/管。
3.加樣(樣本處理區(qū)) 將步驟 1 提取的核酸、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短 暫離心。
4.1
4.2
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
步驟 | 溫度 | 收集熒光信號 | 1cycle | 10min |
2 | 94℃ | 否 | 30sec | |
2.結(jié)果分析判定 結(jié)果分析條件設(shè)定 設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像 調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對照),重新分析結(jié)果。結(jié)果判斷 陽性:檢測通道 Ct 值≤35,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線; 可疑:檢測通道 35值≤38,建議重復(fù)檢測,如果檢測通道仍為 35值≤38,且曲線有明顯的增長曲線, 判定為陽性,否則為陰性; 陰性:樣本檢測結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值。
4.檢測方法的局限性
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
4.病原體在流行過程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
6.試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果;
7.本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。
1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行;
3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存;
5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;
7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;