描述:大鼠Ⅲ型膠原(COL3)ELISA試劑盒操作簡(jiǎn)單、結果精確,臻科生物從業(yè)多年一直專(zhuān)心致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與發(fā)展,以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專(zhuān)業(yè)的技術(shù)服務(wù),贏(yíng)得業(yè)內廣大人士的認可。我司也一直和國內外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系,共同努力合作共贏(yíng)。
一、大鼠Ⅲ型膠原(COL3)ELISA試劑盒詳細介紹
中文名稱(chēng):大鼠Ⅲ型膠原(COL3)ELISA試劑盒
規格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:大鼠
檢測波長(cháng):450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷。
保存及有效期:2-8℃,六個(gè)月
檢測樣本種類(lèi):用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
臻科生物供應的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、人、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等
二、實(shí)驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠Ⅲ型膠原(COL3)水平。用純化的大鼠Ⅲ型膠原(COL3)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入Ⅲ型膠原(COL3),再與HRP 標記的Ⅲ型膠原(COL3)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Ⅲ型膠原(COL3)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD 值),通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中大鼠Ⅲ型膠原(COL3)濃度。
三、試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
四、操作步驟
1. 標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?,用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白孔調零,450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
五、試劑盒計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線(xiàn),根據樣品的
OD 值由標準曲線(xiàn)查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,
即為樣品的實(shí)際濃度。
六、注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開(kāi)封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間
控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn),做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值
大于標準品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計
算時(shí)請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
七.特別提醒
1.標本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能
馬上進(jìn)行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
八.更多優(yōu)勢產(chǎn)品
ZK-03824 大鼠Ⅰ型前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試劑盒
ZK-03825 大鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒
ZK-03826 大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒
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ZK-03830 大鼠Ⅰ型膠原(COL1)ELISA試劑盒
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ZK-03832 大鼠90kDa熱休克蛋白αB1(HSP90αB1)ELISA試劑盒
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ZK-03836 大鼠70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)ELISA試劑盒
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ZK-03840 大鼠5-羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒
ZK-03841 大鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒
ZK-03842 大鼠3-羥基3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMGCR)ELISA試劑盒
ZK-03843 大鼠27kDa熱休克蛋白(HSPB1)ELISA試劑盒
ZK-03844 大鼠25-羥基維生素D3(HVD3)ELISA試劑盒
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ZK-03846 大鼠2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)ELISA試劑盒
ZK-03847 大鼠2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)ELISA試劑盒
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ZK-03849 大鼠12-羥基二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA試劑盒
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