描述:大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)ELISA試劑盒操作簡(jiǎn)單、結(jié)果精確,臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與發(fā)展,以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專業(yè)的技術(shù)服務(wù),贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認(rèn)可。我司也一直和國(guó)內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系,共同努力合作共贏。
一、大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)ELISA試劑盒詳細(xì)介紹
中文名稱:大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)ELISA試劑盒
規(guī)格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:大鼠ELISA試劑盒
檢測(cè)波長(zhǎng):450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷。
保存及有效期:2-8℃,六個(gè)月
檢測(cè)樣本種類:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達(dá)。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
臻科生物供應(yīng)的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、人、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等
二、實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)水平。用純化的大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4),再與HRP 標(biāo)記的Slit同源物3(Slit3)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Slit同源物3(Slit3)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)濃度。
三、試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
四、操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
五、試劑盒計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實(shí)際濃度。
六、注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間
控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)
算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
七.特別提醒
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
八.更多優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品
ZK-03751 大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)ELISA試劑盒
ZK-03752 大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)ELISA試劑盒
ZK-03753 大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)ELISA試劑盒
ZK-03754 大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)ELISA試劑盒
ZK-03755 大鼠S100鈣結(jié)合蛋白(S100)ELISA試劑盒
ZK-03756 大鼠Rho鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子7(ARHGEF7)ELISA試劑盒
ZK-03757 大鼠Ras相關(guān)C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)ELISA試劑盒
ZK-03758 大鼠P選擇素(SELP)ELISA試劑盒
ZK-03759 大鼠Podocin蛋白(PDCN)ELISA試劑盒
ZK-03760 大鼠p53上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子(PUMA)ELISA試劑盒
ZK-03761 大鼠N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)ELISA試劑盒
ZK-03762 大鼠N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體1(GRIN1)ELISA試劑盒
ZK-03763 大鼠N-myc下游調(diào)節(jié)基因2(NDRG2)ELISA試劑盒
ZK-03764 大鼠NADH脫氫酶1(ND1)ELISA試劑盒
ZK-03765 大鼠Mg2+/Mn2+依賴性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)ELISA試劑盒
ZK-03766 大鼠M2-型丙酮酸激酶(PKM2)ELISA試劑盒
ZK-03767 大鼠L1-細(xì)胞粘附分子(L1CAM)ELISA試劑盒
ZK-03768 大鼠Kruppel樣因子4(KLF4)ELISA試劑盒
ZK-03769 大鼠Kruppel樣因子2(KLF2)ELISA試劑盒
ZK-03770 大鼠Klotho蛋白(KL)ELISA試劑盒
ZK-03771 大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒
ZK-03772 大鼠Janus激酶3(JAK3)ELISA試劑盒
ZK-03773 大鼠Janus激酶2(JAK2)ELISA試劑盒
ZK-03774 大鼠GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)ELISA試劑盒
ZK-03775 大鼠E選擇素(SELE)ELISA試劑盒
ZK-03776 大鼠Endoglin蛋白(ENG)ELISA試劑盒
ZK-03777 大鼠E1A結(jié)合蛋白P300(EP300)ELISA試劑盒
ZK-03778 大鼠D-二聚體(D2D)ELISA試劑盒
ZK-03779 大鼠Discs大同源物4(DLG4)ELISA試劑盒
ZK-03780 大鼠Disabled同源物1(DAB1)ELISA試劑盒
ZK-03781 大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白3(DKK3)ELISA試劑盒
ZK-03782 大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒
ZK-03783 大鼠C組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPC)ELISA試劑盒
ZK-03784 大鼠C-型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒
ZK-03785 大鼠C-肽(C-Peptide)ELISA試劑盒
ZK-03786 大鼠CD83分子(CD83)ELISA試劑盒
ZK-03787 大鼠CD40配體(CD40L)ELISA試劑盒
ZK-03788 大鼠CD3d分子(CD3d)ELISA試劑盒
ZK-03789 大鼠CD320分子(CD320)ELISA試劑盒
ZK-03790 大鼠CD30配體(CD30L)ELISA試劑盒
ZK-03791 大鼠CD14分子(CD14)ELISA試劑盒
ZK-03792 大鼠CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β(CEBPβ)ELISA試劑盒
ZK-03793 大鼠cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒
ZK-03794 大鼠C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)ELISA試劑盒
ZK-03795 大鼠B-細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl2)ELISA試劑盒
ZK-03796 大鼠B-細(xì)胞激活因子(BAFF)ELISA試劑盒
ZK-03797 大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC1)ELISA試劑盒
ZK-03798 大鼠B-淋巴細(xì)胞激活抗原B7-2(LAB7-2)ELISA試劑盒
ZK-03799 大鼠BH3相互作用域死亡激動(dòng)劑(Bid)ELISA試劑盒
ZK-03800 大鼠Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)ELISA試劑盒
ZK-03801 大鼠Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)ELISA試劑盒