ELISA試劑盒在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進(jìn)行檢測的樣本,及時(shí)儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。
ELISA試劑盒標本的重復凍融所發(fā)作的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)作損壞作用,然后導致假陰性作用。
凍融標本的混勻亦應留心,不要進(jìn)行劇烈振蕩,重復倒置混勻即可。
標本在保存中如出現細菌污染所構成的的混濁或絮狀物時(shí),應離心堆積后取上清查看。
一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì )對用相應酶作符號的測定辦法發(fā)作非特異性攪擾。
血清標本如是以無(wú)菌操作分別,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。
ELISA試劑盒要留心避免出現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過(guò)氧化物的活性。
在以HRP為符號酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡(jiǎn)單在溫育過(guò)程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
樣本的搜集及血清分別中要留心盡量避免細菌污染,一則細菌的成長(cháng),其所排泄的一些酶或許會(huì )對抗原抗體等蛋白發(fā)作分解作用。