ELISA試劑盒實(shí)驗操作中，須特別注意細節問(wèn)題，細節往往決定著(zhù)試驗的成功與否。關(guān)于
ELISA試劑盒的實(shí)驗操作，這些細節很重要：
1、合理安排檢測量，以免反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。
2、吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差。
3、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4、吸取液體時(shí)速度不易太快，以免產(chǎn)生氣泡，ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。
5、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液。
7、每次實(shí)驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時(shí)先用此孔調OD值至零。
8、要盡量做雙孔實(shí)驗，這樣才既能保證數據的準確性，又能反映出試劑盒的精密度。
9、手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應靜置15～30s，不要將一個(gè)酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
10、為防止樣品蒸發(fā)，試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。
11、樣品稀釋液應用加液器加注，并經(jīng)常校對其準確性。
12、ELISA試劑盒實(shí)驗中，加樣后及時(shí)放人孵箱，標本較多時(shí)，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(cháng)，導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?，難以清洗*。
13、剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
14、沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí)，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來(lái)水。
15、對樣本的結果有疑問(wèn)時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗證。
16、在使用微量加樣器時(shí)，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標準品溶液。
17、ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
