孔雀石綠ELISA檢測試劑盒的操作步驟包括以下幾個(gè)環(huán)節:
1.準備試劑:確保所有試劑回溫至室溫,并搖勻。
2.微孔板處理:取出所需數量的微孔板,未使用的應保存于2~8℃的環(huán)境中。
3.標準品稀釋?zhuān)喊凑照f(shuō)明書(shū)準備6個(gè)濃度的標準品,通常從高到低進(jìn)行系列稀釋。
4.加樣:在酶標板上設定標準品孔,加入不同濃度的標準品,建議每個(gè)濃度做2個(gè)平行孔。
5.競爭反應:加入樣本后,樣本中的孔雀石綠與微孔條上預包被的偶聯(lián)抗原競爭抗孔雀石綠抗體。
6.洗滌:去除未結合的物質(zhì),保證實(shí)驗的準確性。
7.加入酶標記物:與抗體結合,形成抗體-抗原-酶標記物復合物。
8.底物顯色:加入TMB底物進(jìn)行顯色反應,樣本吸光度值與孔雀石綠含量成負相關(guān)。
9.測定吸光度:使用酶標儀測定各孔的吸光度值。
10.計算結果:根據標準曲線(xiàn)比較,得出樣本中孔雀石綠的含量。
1.嚴格按照說(shuō)明書(shū)的步驟進(jìn)行操作,避免交叉污染。
2.使用前確保試劑沒(méi)有過(guò)期,且儲存條件符合要求。
3.加樣時(shí)要注意精確度,避免產(chǎn)生氣泡,以免影響結果。
4.洗滌時(shí)要徹,以確保實(shí)驗結果的準確性。
5.在操作過(guò)程中要防止光線(xiàn)直射,避免影響顯色反應。
6.使用后的試劑和廢棄物要按照生物安全規定處理,避免環(huán)境污染。