咱們在運用
ELISA試劑盒96孔板的試驗測定的時(shí)分,常發(fā)現有“邊緣效應",也就是外周孔顯色較基地孔深。經(jīng)研究證真實(shí)溫育中的熱力學(xué)梯度也許是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導體,在試驗室的常規ELISA測定中,將板從室溫(通常在25℃擺布)置于37℃溫箱,板也升溫時(shí),在外周孔與基地孔之間也許存在一熱力學(xué)梯度。因而運用水浴或在將反響溶液參加至板孔中時(shí),將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地掃除“邊緣效應",而且可進(jìn)步測定的重復性。
ELISA試劑盒還有就是在試驗中,必定有運用微量加樣器參加樣本的步驟。提示留意:加樣不行太快,要防止加在孔壁上部,不行濺出和發(fā)生氣泡。ELISA試劑盒太快的話(huà)無(wú)法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區,易致使非特異吸附。濺出會(huì )對附近孔發(fā)生污染。出現氣泡則反響液界面有區別。所以,有時(shí)分一份標本用一樣的試劑盒這次測定為陽(yáng)性,下次測定為陰性,通常就是上述加樣及試劑的過(guò)錯所造成的。
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